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      PC-3/nKR人前列腺癌細(xì)胞

      更新時間:2026-01-04

      簡要描述:

      PC-3/nKR人前列腺癌細(xì)胞
      上海研尊生物提供專業(yè)的細(xì)胞資源庫
      ATCC細(xì)胞庫、DSMZ細(xì)胞庫、CLS細(xì)胞庫、JCRB細(xì)胞保藏中心、ECACC細(xì)胞庫、KCLB細(xì)胞庫、RCB細(xì)胞庫、RIKEN細(xì)胞庫、Sigma細(xì)胞庫、中科院細(xì)胞庫
      進口引種細(xì)胞系,種類齊全,帶有STR鑒定、支原體檢測、測序驗證,細(xì)胞來源可靠、背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好

      型號:點擊量:134
      品牌研尊生物貨號YZ69788
      規(guī)格1 X 106cells/T25或1 mL凍存管供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途科研實驗

                                                                                                           PC-3/nKR人前列腺癌細(xì)胞
      上海研尊生物提供專業(yè)的細(xì)胞資源庫
      ATCC細(xì)胞庫、DSMZ細(xì)胞庫、CLS細(xì)胞庫、JCRB細(xì)胞保藏中心、ECACC細(xì)胞庫、KCLB細(xì)胞庫、RCB細(xì)胞庫、RIKEN細(xì)胞庫、Sigma細(xì)胞庫、中科院細(xì)胞庫
      進口引種細(xì)胞系,種類齊全,帶有STR鑒定、支原體檢測、測序驗證,細(xì)胞來源可靠、背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好

      細(xì)胞名稱:PC-3/nKR人前列腺癌細(xì)胞

      品牌:上海研尊生物
      貨期:現(xiàn)貨
      細(xì)胞數(shù):1x10^6 cells
      細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)

      種屬來源:人
      性別年齡:男性,62歲
      組織來源:前列腺
      生長特性:貼壁生長
      細(xì)胞形態(tài):上皮樣
      細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
      培養(yǎng)條件:RPMI 1640 + 10% h.i. fetal bovine serum (FBS)
                37 ℃, 5% CO2
      凍存條件:90% FBS + 10% DMSO
      傳代方法:1:3傳代,2-3天傳1代

      細(xì)胞培養(yǎng)操作
      干冰運輸:收到細(xì)胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇
      常溫運輸:收到細(xì)胞后,請立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代
      細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)80% - 90%,即可進行傳代培養(yǎng)
      培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟
       對于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細(xì)胞的脫落。
      1.收到細(xì)胞后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細(xì)胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況,這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。
      2.對于貼壁細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。
      3.對于懸浮的細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
      凍存管細(xì)胞操作步驟
      注意: 為保證細(xì)胞的高活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。
      1.將凍存管置于37℃水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。
      2.一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。
      3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。
      4.用完培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。
      5.將細(xì)胞置于含有合適CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
      貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)
      1.吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤洗一次。
      2.加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。
      3.加入2mL完培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細(xì)胞分散。
      4.將細(xì)胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
      懸浮細(xì)胞傳代可參考以下方法:
      一、直接傳代法
      1.待懸浮細(xì)胞長滿至 80%~90%(細(xì)胞懸液變黃),即可傳代;
      2.用吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2~1 / 3;
      3.加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
       二、離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下)
      1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);
      2.150 g 離心 5 min,棄去上層清液;
      3.使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;
      4.吸管吸取適量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
      細(xì)胞凍存操作
      1.1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識;
      將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存

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